血清学检测在猪传染病防控中的应用

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[ 更新时间：2013-08-16 ]

血清学检测在猪传染病防控中的应用

血清学检测就是根据猪群规模，在特定的时期对各阶段猪群按比例采集血清样品，在实验室利用标准化检测试剂盒，检测样品的血清抗体滴度，并采用科学的方法分析猪群疫病的流行规律以及动态学过程，评价猪群免疫状态，为猪场管理者提供数字化的信息，科学防控猪传染病。

1 血清学检测的目的

1.1 引进新猪群

在引进新猪群之前，进行群体血清学检测，避免引入阳性带毒个体。

1.2 预测免疫接种时间

在猪病防控中，恰当的免疫接种时间往往是有效免疫的关键，使用疫苗尤其是活苗的时候，一定要考虑母源抗体的影响，最可靠和可行的方法就是通过血清学方法来测

定母源抗体的消长，确定免疫接种的最佳时机。首次免疫接种时抗体的转阳率与ELISA抗体的阻断率呈明显的负相关，即免疫前抗体水平越高(体现为阻断率的上升)，免疫效果越差。当母源抗体的阻断率高于70％时，免疫很难奏效。

1.3 疫苗效果的评价

疫苗生产厂家繁多，质量参差不齐，疫苗的运输、管理、保存、注射等诸多环节都会影响疫苗的效力，通过血清学检测可以了解免疫注射后猪群体内是否产生保持抵抗

猪病强毒攻击的有效抗体，从而科学合理地做好免疫。

1.4 分析疫病发生的动态

通过定期的分阶段、分群体血清学检测能掌握疫病的发展动态，比如可以了解在种猪群中蓝耳病是否处于“稳定状态”、是否存在先天性感染和早期感染、生长育肥文章编号：1004—5090(2013)02—0024—02猪在什么时间感染蓝耳病、蓝耳病是否和喘气病同时发

生，从而在敏感时期采取特定的干预措施，以避免或降低疫病造成的损失。

1.5 疫病的诊断

虽然血清学检测能成功地用于免疫评估，但也有一些直接检测抗原或能够区分野毒和免疫抗体的方法，如herdchek猪瘟抗原ELISA试剂盒、CHEKIT猪瘟抗原试剂盒等能够直接检测到猪瘟病毒的抗原成分，猪伪狂犬病病毒gI抗体试剂盒、CHEKIT口蹄疫3ABC抗体试剂盒等能够将免疫抗体和野毒抗体很好区分。另外，虽然有一些方法既可以检测到免疫抗体和感染抗体，但由于多数情况下野毒抗体与免疫抗体往往在滴度或特性上存在区别差别，

所以也可以提示养殖者是否存在野毒感染，如在使用Herdchek猪瘟抗体试剂盒来检测血清抗体时，研究者发现，将阻断率在70％以上的血清进一步稀释到40倍，免疫血清大多会呈现阴性结果，而多数人工感染猪只的血清则仍然呈现阳性结果。

1.6 考察猪群的动态学变化

猪场的生产总是存在波动，如果猪场有生产正常时的血清学检测资料，再将生产异常时的资料与常规资料档案进行对比，很容易查到出现问题的原因。另外如果在猪群发病时分别采取发病期和恢复期的血清，通过分析抗体滴度的变化，也有利于进行疫病的诊断与分析。

1.7 疫病的净化

血清学检测用于疫病净化的经典案例是伪狂犬病。由于gE基因缺失疫苗的应用使得我们可以通过血清学方法区分疫苗注射动物和野毒感染动物，通过与gE基因缺失疫苗配套的gE—ELISA试剂盒的检测与分析，科学指导猪场伪狂犬病的净化过程，欧盟许多国家以及美国伪狂犬病的净化已经取得成功，在中国同样有许多猪场也获得成功。另外口蹄疫也可以通过非结构蛋白ELISA方法区分野毒感染动物和疫苗注射动物，这极大方便了猪场的诊断和流行病学分析。

2 血清学检测采样与送检方法

2.1 采样分组

通常采样应包括种猪群和生长猪群。种猪群应包括公猪、不同胎次的经产母猪以及已经选育的后备猪。生长猪根据周龄不同可分为6～7组，每组间隔3～4 W，根据检测疫病的种类不同应有所调整，比如对于蓝耳病、伪狂犬病、猪瘟等可分别采集4、7、10、13、l6、20、24周龄生长猪的血清样品。

2.2 采样数量

采样数量与猪群的规模大小相关，通常是以基础生产母猪的数量来确定。一般按基础生产母猪数量的10％～15％抽样，进行血清学检测。

2.3 器材

为便于血清学检测，应准备一些基本的器材，比如低速离心机、一次性注射器、记号笔、无菌试管、1．5 ml离心管、泡沫箱、冰袋等。

2.4 采样方法

猪血清样品的采集通常选用颈静脉、前腔静脉，也可选耳静脉。用一次性注射器无菌采血3 ml～5ml，置无菌试管中摆成斜面，室温下静置2～4 h(防止阳光曝晒)，待血清充

分析出后，或离心分离血清，用无菌注射器吸出血清，注入灭菌离心管中，盖紧离心管盖，通常情况下进行常规的检测每份血清样品总量应不少于1 ml。

2.5 样品的记录应尽量详细

送往实验室的样品应有一式二份的送检报告，一份随样品送实验室，另一份留存备案。样品记录应包括以下内容：猪场的名称地址；饲养品种及其数量；饲养方式、是否自繁自养、断奶日龄、各个猪群的免疫程序和免疫日期、所用疫苗的种类以及是否发病及用药情况等。

2.6 血清样品的运送

血清样品必须在24 h内放在4℃左右的容器中送到实验室，24 h内不能送到实验室的，需要在运送过程中保持样品温度处于一20"C以下，这样才能保证检测结果的准确。

本文内容摘自《河南畜牧兽医 2013年（第34卷）第2期》